分享一篇发表在ACS chem bio的文章：Chemical Biology Approaches Confirm MCT4 as the Therapeutic Target of a Cellular Optimized Hit。文章的通讯作者是来自阿斯利康公司的Aarti Kawatkar, M. Paola Castaldi, Frederick W. Goldberg, Andrew X. Zhang。

乳酸的转运对于维持肿瘤细胞糖酵解十分重要，因此抑制乳酸转运来杀死肿瘤细胞是治疗肿瘤的一个思路，其中单羧酸转运蛋白MCT4是对肿瘤关键的转运蛋白，因此这里作者计划开发特异性抑制MCT4的抑制剂。

首先作者通过对活细胞外的乳酸浓度测量可以实时动态监控乳酸的转运，随后作者使用此方法对2W个小分子进行筛选，成功筛选到了小分子AZ1422可以显著抑制乳酸转运。之后作者将AZ1422用在K562（乳酸转运不依赖MCT4）以及NCI-H358（乳酸转运主要依赖MCT4）细胞中，该细胞中没有MCT4的表达，经过对比作者发现AZ1422的靶标主要MCT4。

随后作者打算验证AZ1422的直接靶标是MCT4，因为该蛋白是膜蛋白，难以纯化和表达，因此作者合成了AZ1422的光交联探针，通过探针与AZ1422的竞争性质谱实验，作者成功鉴定到了AZ1422的探针有且只有一个靶点即MCT4。表明其直接靶标很有可能是MCT4。

最后作者使用细胞热转移测定实验（CETSA）对NP40处理下溶解在溶液中未变性的MCT4进行了测量，成功观察到shift，表明AZ1422的靶点就是MCT4。

总之作者成功筛选到可以抑制乳酸转运的药物AZ1422，并通过化学生物学手段证明了其靶点为MCT4。

本文作者：WXH