生物素（Biotin）广泛存在于自然界中，可与蛋白质，核酸，多糖等多种大分子偶联。生物素与亲和素（avidin）之间的亲和力比抗原抗体的亲和力高至少1万倍；每个亲和素分子能结合4个分子的生物素，这一特点可用于构建信号放大级联系统，对于蛋白质分析及组学分析不失为一种好方法。

     对于生物素标记实验，其标记率，标记时间都是实验中需要考虑的重要因素，获得一种省时，标记效率高的生物素连接酶对于标记实验的成功与否是非常关键的。常用的生物素标记酶是来源大肠杆菌的生物素连接酶BioID，对比其他标记酶，其标记过程简单且无害，仅需要加入生物素即可，该体系已被广泛应用。

Tess C. Branon等人利用易错PCR结合酵母展示系统在原始生物素连接酶基础上进行多轮建库及筛选，通过流式检测的方法，先获得活性最高的一条突变体序列G3；发现在不额外加入外源生物素的情况下其拥有链霉亲和素的信号，在哺乳体系和酵母体系都有该项发现。因而在G3的基础上又重新设计了两种进化方案，一种是删掉G3的N端1-63位氨基酸，截短后的G3结果发现链霉亲和素的信号下降了，最终获得了突变体miniTurbo。另一种是在G3基础上继续通过易错PCR建库筛选，最终突变体的活性没有再进一步提高，获得最终突变体TurboID。如果考虑产量与回收率，TurboID无疑是最佳的选择，若考虑标记的时间窗口，miniTurbo是优于TurboID的。虽然miniTurbo活性高于TurboID，但可能是由于N端缺少片段的原因，其稳定性相对不高，且其对生物素的依赖程度也较高。期待后续更多科学家在此基础上做出更多优化可能，给广大实验人员带来福利。